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课题负责人：常丽杰
课题承担单位：浙江杭州市余杭实验中学
课题名称：新课程背景下普通高中英语学困生的提高策略
课题类型：全国重点
课题编号：ZJ140621
研究进度：已结题 |
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项目：福建省教育厅B类科研项目（JB11300）
摘要：目的：总结本人在显色培养基检测沙门氏菌方面一些初步认识与体会；方法：通过查阅相关资料和本人在检验实践中的体会，进行分析；结果：沙门氏菌显色培养基种类、应用比对研究现状、注意事项等；结论：以供其他技术人员参考。
关键词 显色培养基 沙门氏菌 认识与体会
显色培养基是近年来发展起来的一种新型培养基。在传统培养基制作基础上，添加了新型组合式特异性发色酶底物，当细菌生长代谢过程中产生的特异性酶特异性发色底物后，目标菌形成不同颜色的菌落，从而对目标菌得到快速的分离和鉴别，同时也可以进行计数。沙门氏菌是重要食源性，目前沙门氏菌检测主要采用传统的生化方法，包括增菌、分离培养、生化鉴定、血清鉴定等多个步骤。耗费时间久，一般一周的时间，操作繁琐，准确度差，近年来沙门氏菌显色培养基以它的强选择性，操作简单、耗用时间短被大众所接受。与其他显色培养基相比，接受度更好一些。 经过长期使用显色培养基进行沙门氏菌检测的过程总结，以及查阅其他技术人员应用研究成果，得出以下几点体会。
1种类：
1.1进口沙门氏菌显色培养基：
市面上的有法国科马嘉、法国AES、英国OXOID、美国BD等品牌，他们共同特点是菌落小、沙门氏菌与其他菌落颜色对比强烈。进口沙门氏菌显色培养基使用最广泛的是法国CHROMagar显色培养基，沙门氏菌显紫色。
1.2国产沙门氏菌显色培养基：
由于沙门氏菌显色培养基使用方便，减少检验技术工作量，国内很多培养基厂家都进行了自主研发，目前国产沙门氏显色培养基销量最大有北京陆桥、广东环凯、青岛海博。北京陆桥的颜色判断与法国科马嘉显色培养基相同：沙门氏菌为紫红色，非沙门氏菌是蓝绿色、无色或不生长。广东环凯沙门氏菌显色培养基2009年获得全国发明银奖。颜色判定为沙门氏菌为粉红色。大肠菌群和大肠杆菌显蓝色。枸橼酸杆菌显紫色。其他菌落显黄色或者无色。
2应用研究
法国CHROMagar公司从1974年就开始研发显色培养基，沙门氏菌显色培养基是从2000年开始使用，使用研究有两大方面：一是沙门氏菌显色培养基与传统选择性培养基进行比对实验，从而得出沙门氏显色培养基可以取代传统选择性培养基的结论；二是国产沙门氏菌显色培养基与进口沙门氏菌显色培养基进行比对试验。
2.1沙门氏菌显色培养基与传统选择性培养基比对研究
可查的有2001年广西食品卫生监督检验所卢汉兴《显色培养基在微生物检验初筛中的应用》、2002年广州铁路中心卫生防疫站梁春梅《沙门菌显色培养基在健康体检沙门菌检测中的应用》、2004年江苏省兽药监察所周春红等《科马嘉显色培养基在检测饲料中沙门氏菌的应用评价》、2011年辉南县疾病预防控制中心安静的《应用显色培养基检测沙门氏菌的初步研究》、2007年嘉庆市疾病预防控制中心沈志英等《260份农产品食源性致病菌检测结果分析》、2006年长春市疾病预防控制中心龚云伟等《科马嘉显色培养基在病原微生物分离中的应用》等。涉及检测对象有临床检测、饲料、农产品、健康体检等样本。经过比对得出沙门氏菌显色培养基是可以取代传统选择性培养基进行实验，而且比传统选择性培养基特异性和灵敏度更好。但是使用沙门氏菌显色培养基价格昂贵，使用它提高检测成本。
2.2 国产沙门氏菌显色培养基与进口培养基的效果对比研究
由于进口沙门氏菌显色培养基价格昂贵，国内培养基厂家研发出国产沙门氏菌显色培养基，那么国产沙门氏菌显色培养基是否能取代进口沙门氏菌显色培养基。国内很多技术人员开展了与法国科马嘉的比对试验，其中比对试验开展比较的多是广东环凯生产沙门氏菌显色培养基，可查的有2006年广东环凯微生物科技有限公司张淑红《显色培养基在几种食源性致病菌快速检测中的应用》、2007年广东省疾病预防控制中心朱海明《显色培养基在检测食品中沙门氏菌的应用研究、2008年广东环凯微生物科技有限公司卢勉飞等《显色培养基快速检测沙门氏菌效果的研究》、2009年河南省疾病预防控制中心张秀丽《两种沙门氏菌显色培养基实际应用效果比对研究》以及本人今年《两种沙门氏菌显色培养基在水产品检验中应用比对研究》和《沙门氏菌显色培养基在从业人员健康体检中应用比对研究》。涉及的检测对象有临床、食品、农产品、水产品等样本。经过比对研究得出国产沙门氏菌显色培养基具有菌落大、易挑起等特点。与进口沙门氏显色培养基使用无差别。
3、沙门氏菌显色培养基使用注意事项
3.1伤寒沙门氏菌容易漏检，由于个别伤寒沙门氏菌在显色培养基生长的颜色为无色，所以在检测过程中要注意观察无色菌落。
3.2显色培养基上面所长的阳性菌落不能直接确认为沙门氏菌。因为沙门氏菌不同血清型存在特异性酶反应的差异，在显色培养基上出现不同颜色的菌落。
3.3煮沸温度最好控制在90-95℃之间，温度太高容易溢出，煮沸时间为10-20min，无需高压灭菌。温度冷却到46℃时倾注平板，平板保质期为2-5天，保存温度为2-8℃。
3.4在接种显色培养基之前最好经过增菌，除非样本中菌量比较多。
3.5从显色培养基接种做生化鉴定时候，要做菌液纯培养，否则显色培养基上的显色剂容易干扰生化结果。
3.6进行沙门氏菌检测比对研究中，没有对药品实际样本进行，所以药品中沙门氏菌检测是否可以使用沙门氏菌显色培养基，有待验证。
以上是本人在查阅资料和检验实践中认识与体会，以供其他技术人员参考，有不到之处欢迎指正。
参考文献
[1]食品安全国家标准-沙门氏菌检验，GB4789.4-2010[S]
[2]田帧干，辛棋，张晓航等.CHROMagar显色培养基在口岸从业人群沙门菌检测中的应用与评价[J].现代预防医学.2007,34（24）：4648.
[3]杨兰萍，许学斌，姚宗蓓等.CHROMagar显色培养基分离沙门菌的初步应用和评估. [J].检验医学.2005,20(1):52-54.
[4]汪士蔷.CHROMagar显色培养基检测沙门菌的方法探讨[J].中国卫生检验.2005,1(15)1:99.
[5]卢汉兴，车光，王红等.显色培养基在微生物检验初筛中的应用[J].广西预防医学.2001,2(7)1:44-45
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